Независимые исследования

12.03.2020

Независимые исследования на лабораторных животных по препарату PROSTROLANE NATURAL-B

Руководитель исследования:
Александр Туркевич — кандидат медицинских наук, доцент Львовского национального медицинского уни- верситета, профессор дерматологии Римского Университета «G.Marconi». Сертифицированный специалист по дерматовенерологии и онкологии. Член EADV, ?ADV, ISD, WHA, УАЛДВК. Председатель Европейского Комите- та по протоколам в дерматологии и венерологии World Health Academy. Официальный рецензент журналов «Dermatological therapy», «Internal medicine». Член редколлегии «Czech Journal of Dermatovenereology», «Egyptian Journal of Dermatovenereology» and «Journal of Global Dermatology». Научный руководитель ежегодного Съезда специалистов эстетической медицины. Научный руководитель и соучредитель Клуба ботулотоксинов.

ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКАЯ БАЗА — научная лаборатория Львовского национального медицинского университета.

ЦЕЛЬ исследования: Определить структурные изменения параметров кожи в тестовой и контрольной группах после терапии препаратом Prostrolane Natural-B.

МЕТОДЫ исследования:
1. Гистология кожи.
2. Гистохимия кожи.
3. Иммуногистохимическое исследование тканей.

ИССЛЕДУЕМЫЕ ПАРАМЕТРЫ: фиброзные и/или другие изменения тканей.

МОДЕЛЬ исследования:

Длительность исследования — 6 месяцев.
Подопытные животные — крысы.
Общее количество подопытных животных — 30 крыс.
Количество подопытных групп – 3 группы (тестовая — 1, контрольная — 2)

Тестовая группа

Исследуемый препарат	Количество крыс в группе
Prostrolane Natural-B	10

Контрольные группы

Препараты контроля	Количество крыс в группе
NaCl 0,9% (физ.раствор)	10
Нестабилизированная ГК20 мг/мл (мол.вес 1млн Да)	10

ГРАФИК ФИКСАЦИИ промежуточных и окончательных результатов исследования:

Контроль	Временные промежутки от старта исследований
№ 1	2 недели
№ 2	1 месяц
№ 3	3 месяца
№ 4	6 месяцев

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Изменения в тканях через 2 недели после введения Prostrolane Natural-B и контрольных препаратов.

Гистология кожи		ПЕРВИЧНОЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ по применению Prostrolane Natural-B через 2 недели после введения препарата.
	После введения NaCl 0,9%	Морфологическая картина изученных биопсий после использования Prostrolane Natural-B: Увеличенное количество фибробластов по сравнению с контролем. Наличие препарата было сохранено в виде диффузно расположенного однородного вещества. Определены начальные проявления ангиогенеза в месте введения. Гистохимическое окрашивание показало, что коллагеновые волокна преобладают в качественном составе; количество эластичных волокон незначительно.
	После введения нестабилизированной ГК
	После введения PROSTROLANE NATURAL-B

Гиcтохимия кожи		ПЕРВИЧНОЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ по применению нестабилизированной ГК через 2 недели после введения препарата.
	После введения NaCl 0,9%	Морфологическая картина изученных биопсий после введения ГК: Наличие изолированных тканевых гистиоцитов. Большее количество фибробластов по сравнению с контролем. В большинстве образцов биопсии капиллярные сосуды определялись централизованно, но их количество было незначительным. Гистохимия: использование ГК также определяло преобладание коллагеновых волокон над эластичными, однако при количественной оценке можно утверждать, что они чаще присутствуют в первой группе исследования, где вводился препарат Prostrolane Natural-B.
	После введения нестабилизированной ГК
	После введения PROSTROLANE NATURAL-B

Изменения в тканях через 4 недели после введения Prostrolane Natural-B и контрольных препаратов.		ЗАКЛЮЧЕНИЕ через 4 недели после введения Prostrolane Natural-B.
Гистология кожи		ПЕРВИЧНОЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ по применению Prostrolane Natural-B через 4 недели после введения препарата.
	После введения NaCl 0,9%	Морфологическая картина изученных биопсий после использования Prostrolane Natural-B: Незначительный интерстициальный отек наблюдался вокруг областей накопления препарата. Образовались сосуды капиллярного типа, артериолы и венулы, которые располагались в пролиферативной соединительной ткани. Количество эластичных и коллагеновых волокон в этой области было больше, чем в нетронутых частях дермы. Гистохимическое окрашивание по Малори показало, что значительное количество коллагеновых волокон было обнаружено в месте инъекции и их объем оставался стабильным по сравнению с результатом после 2-х недель.
	После введения нестабилизированной ГК
	После введения PROSTROLANE NATURAL-B

Гиcтохимия кожи		ЗАКЛЮЧЕНИЕ через 4 недели после введения нестабилизированной ГК.
	После введения NaCl 0,9%	При использовании препаратов с ГК наблюдалось несколько большее количество волокон соединительной ткани, по сравнению с предыдущей стадией, имел место умеренный интерстициальный отек. Количество сосудов осталось на прежнем уровне, их качественный состав не изменился. Гистохимия: при использовании препаратов с ГК, количество коллагена по сравнению с предыдущим этапом исследования несколько уменьшилось; его количество в месте инъекции было больше, чем в интактных областях.
	После введения нестабилизированной ГК
	После введения PROSTROLANE NATURAL-B

Изменения в тканях через 6 недель после введения Prostrolane Natural-B и контрольных препаратов.		ЗАКЛЮЧЕНИЕ через 6 недель после введения Prostrolane Natural-B и нестабилизированной ГК.
Гистология кожи		При гистологическом исследовании биопсии кожи, после введения Prostrolane Natural-B, была обнаружена картина, немного отличная от картины на 28-й день. В части фрагментов кожи было визуализировано однородное пурпурное вещество, объем которого несколько уменьшился по сравнению с 14 днем, появились признаки его коллапса. Инфильтрация в подкожно-жировой клетчатке была представлена изолированными макрофагами и лимфоцитами. Признаков острого воспаления или аллергической реакции не обнаружено. Выявлены проявления новообразованного микроциркуляторного русла. Количество фибробластов было незначительным, были определены шероховатые слоистые волокна соединительной ткани.
	После введения NaCl 0,9%
	После введения нестабилизированной ГК
	После введения PROSTROLANE NATURAL-B
Гистохимия кожи		Морфологическая картина после введения ГK характеризовалась наличием сформированной грануляционной ткани с наличием всех типов сосудов микроциркуляторного русла и грубых волокон соединительной ткани, имеющих однонаправленный вектор расположения. Любая инфильтрация практически отсутствовала. Наблюдались только единичные мононуклеарные клетки. Гистохимическое окрашивание по Малори показало, что количество коллагеновых волокон, по сравнению с эластичными, не изменилось в обоих случаях. Однако, было отмечено, что их общее количество сократилось по сравнению с предыдущими периодами.
	После введения NaCl 0,9%
	После введения нестабилизированной ГК
	После введения PROSTROLANE NATURAL-B

Выводы по результатам независимых исследований на лабораторных животных по препарату Prostrolane Natural-B

Prostrolane Natural-B:

Инфильтрация, состоящая в основном из макрофагов, лимфоцитов и гистиоцитов, появилась уже на 14-й день с момента введения и сохранялась на постоянном уровне активности до 28- го дня. Уже начиная с 6-й недели, воспалительный ответ терял свою активность (наличие единичных клеток) и до 8-й недели фактически отсутствовал.
Ангиогенез характеризовался типичными этапами развития, и уже по состоянию на 8-ю неделю наблюдалось сформированное артериоло-венулярное русло в месте имплантации,
Объем коллагена прогрессивно увеличивался с 14-го по 28-й день, его количество по отношению к волокнам эластина было превалирующим и в дальнейшем оставалось на стабильном уровне до 8-й недели.

Нестабилизированная гиалуроновая кислота 20 мг/мл:

Инфильтраты, которые имели типичный состав (лимфоциты, макрофаги, гистиоциты), появились на 2-й неделе с начала эксперимента, когда и был зафиксирован их пик. Однако, уже с 4-й и до 8-й недели определялось фактически полное их отсутствие.
Начиная с 14-го дня появлялись сосуды капиллярного типа, а по состоянию на 8-ю неделю сформировалось артериоло-венулярное русло вокруг зон имплантации, однако его объем был незначительный.
Пик коллагеногенеза пришелся на 14-й день. Однако, начиная с 28-го дня количество коллагеновых волокон уменьшалось и оставалась стабильно низким до 8-й недели.

Оба препарата полностью лизировались до 8-й недели.
Оба препарата стимулировали фибробласты к чрезмерному коллагеногенезу. Однако, более длительный эффект наблюдался при использовании Prostrolane Natural-B.

ПРИМЕЧАНИЕ!

Показатель тканевого дыхания был взят как основной показатель для сравнения скорости метаболизма в организме человека и крысы. Так как этот показатель указывает на скорость общего обмена и связан со всеми обменными процессами в организме. По данным литературных источников (показатели нормы у лабораторних животных в токсикологическом эксперименте, «Медицина», Москва, 1978) величина тканевого дыхания у крысы – 14,17 мл/кг/мин (85±5,68 мкл на 100 мг влажной ткани за 1 час). При соотношении его с человеческим – 3,5 мл/кг/мин, получаем разницу в 4,047 раз, что позволяет утверждать, что биосинтез и биодеградация коллагена у крыс на разных сроках соответствует таким срокам у людей:

1 НЕДЕЛЯ У КРЫС = 4 НЕДЕЛИ У ЧЕЛОВЕКА